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瓊氏不動桿菌的優勢及保存方法

  瓊氏不動桿菌,非模式菌株,主要用途為研究、教學。烷烴降解,30℃下生長,以十八烷烴為唯一碳源。
  菌種特征特性
  烷烴降解,30℃下生長,以十八烷烴為唯一碳源。革蘭氏染色陰性,桿狀,靜止期呈球形,常成對,也可呈不同長度的鏈狀,無芽孢; 菌落特征:LB培養基上呈圓形,隆起,菌落淡黃,不透明,邊緣光滑平整,濕潤,30℃下生長良好。
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  產品優勢
  產品質量穩定,是為科研和生產提供微生物菌種資源共享服務的專業平臺。
  國內首創封閉管包裝,凍干后的菌株使用時添加配套的復蘇培養基后迅速而完全溶解。針對不同的菌株提供八種不同的培養方法,保證菌種的復蘇質量。
  嚴格的質檢程序,確保產品質量的穩定性。
  該類產品廣泛使用到食品、藥品、化妝品、水產品、化工等行業,疾控中心、質檢局、出入境、藥檢局等等,得到廣泛好評。
  上海滬崢產品性價比適中,從銷售到售后,給您完善的服務。
  保存方法
  傳代保存法:培養基的濃度不宜過高,營養成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養溫度通常以稍低于較適生長溫度為好。
  懸液保存法:
  蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數年。本法應注意避免水分的蒸發。
  糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
  載體保存法:土壤保存法;砂土保存法;硅膠保存法;磁珠保存法;麩皮保存法;紙片(濾紙)保存法。
  常用的冷凍保存法:
  ①低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。
  ②干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。
  ③液氮保存法(-196℃):是適用范圍微生物保存法。
  五、實驗內容
  稱量→溶化→調pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查
  干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物
  高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查
  過濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌
  微生物菌種的培養
  孢子制備
  放線菌孢子的制備
  一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養環境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天。
  霉菌孢子的制備
  霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時間為4~14天。
  種子制備
  ⑴搖瓶種子制備
  搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。
  ⑵種子罐種子制備
  種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發酵罐內發酵,稱為二級發酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發酵罐內發酵,稱為三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為四級發酵。
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