嗜熱脂肪芽孢桿菌（Bacillus stearothermophilus）屬嗜熱性需氧芽孢桿菌，但兼有厭氧的特性，細(xì)菌繁殖體G蘭氏染色陽性呈紫色，細(xì)菌芽胞孔雀綠著色。嗜熱脂肪芽孢桿菌比較容易識別且對人體沒有危害性，一般作為空間消毒的指示生物。

　　主要特性

　　嗜熱脂肪地芽孢桿菌營養(yǎng)細(xì)胞呈長桿狀、圓端，多數(shù)為單個、少數(shù)成對或鏈狀排列，細(xì)胞寬 0． 6 ～ 1.μm、長 2. 0 ～ 3.5μm，細(xì)胞壁為革蘭陽性結(jié)構(gòu)，但染色可在陽性和陰性之間變化。芽孢呈橢圓或柱狀、端生或次端生，孢囊膨脹或不膨脹，無伴孢晶體形成。較佳生長溫度為 56 ～ 60℃，較高生長溫度為 65 ～ 75℃，較低生長溫度為 30 ～ 45℃，需氧或兼性厭氧，利用葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。現(xiàn)中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心( CICC) 收藏菌株為嗜熱脂肪地芽孢桿菌編號為 CICC 10267 株，即 ATCC 7953 株，其在營養(yǎng)瓊脂上56℃培養(yǎng) 24h 的菌落形態(tài)呈淺黃色，表面粗糙濕潤，邊緣不整齊 ; 該菌株在 Cook等產(chǎn)孢培養(yǎng)基上 56℃培養(yǎng) 24 h，取菌苔涂片經(jīng)芽孢染色法染色后，1 000倍光學(xué)顯微鏡下觀察到多數(shù)仍為染成紅色的繁殖體與部分已經(jīng)形成染成藍(lán)色的芽孢形態(tài) ; 在產(chǎn)孢培養(yǎng)基上 56℃培養(yǎng) 5 d，鏡下觀察到 90% 以上為已經(jīng)形成染成藍(lán)色的芽孢，只有少數(shù)是染成紅色的繁殖體。

　　培養(yǎng)基

　　營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（NA）

　　胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基（TSA）

　　培養(yǎng)基（以上三款任選一種即可）

　　保藏條件

　　斜面菌種和凍干菌種應(yīng)在 2-8°C 保存。西林瓶請放-20°C 保存。

　　注意事項

　　凍干首次活化，干粉要全部用完，不能預(yù)留，用 0.1-0.2ml 的培養(yǎng)液或無菌水溶解，接種在 1-2 個斜面上，因凍干粉處于休眠狀態(tài)，請勿接種多支斜面或平板，以避免因接種量不足而導(dǎo)致復(fù)蘇不成功；如有不明白之處，請務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員，避免不必要的損失；

　　微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時間過長會導(dǎo)致菌種衰退；

　　菌種操作應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行；轉(zhuǎn)種完畢，應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理；

　　斜面菌種保藏時間通常為 3-6 個月；應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時轉(zhuǎn)接；凍干菌種保藏時間通常為 2-25 年；

　　菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降，應(yīng)及時和中國微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系。

　　六、單層凍干管打管說明書

　　安瓿瓶開封：用浸過 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍，并保持在火焰旁操作。

　　注意事項：菌種活化前，請將安瓿管保存在 4-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過冷凍干燥并抽真空保存的，，開啟后必須一次使用完，不能留菌粉下次使用；另外，安瓿管里大部分是用牛奶作為保護(hù)劑，里面菌體為少數(shù)，復(fù)蘇時要全部菌懸液接在新鮮培養(yǎng)基上，否則可能造成復(fù)蘇不成功；

　　凍干菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài)，有時延滯期較長，如在說明書建議的培養(yǎng)時間還未長起來，請繼續(xù)在相應(yīng)的環(huán)境下多培養(yǎng) 24 小時或者更長時間，直至菌種培養(yǎng)完成；有的菌種需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長，一般來說，菌種穩(wěn)定后才能用于您的后續(xù)實驗。

　　暫不啟開的安瓿管應(yīng)于 4℃中保藏（特殊除外）。

　　凍干管打開后需一次用完，不能留存。

　　打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。